色谱柱正向使用反向冲洗优势和原理

先说说柱子能不能反冲的问题，色谱柱到底能不能反冲？如果色谱柱两端的筛板孔径相同反冲是不会有什么问题的，从填料流失的角度来说，粒径为5um，而筛板孔径为2um，这种情况下正冲反冲都不会造成填料的流失；此外，从柱子装填的角度来说，装柱时是按照与柱身箭头相反的方向装填的，与反冲时的液体流路方向相同，装柱时那么高的压力（通常大于40MPa）下用顶替液冲刷都没有问题，难道区区1ml/min流速下的十几个MPa会造成柱床松动？更何况反冲时通常用的要么是90％水、要么是90％或纯的有机相，这么低的压力又能对柱床造成什么样的损伤？还有，填料的C18长链是键合在裸硅胶上的，碳链的自由舒展对分析是zui有利的，不是说你长期朝一个方向使用碳链就像水草一样朝一个方向倒，用甲醇或乙腈等冲洗之后它会回复自由舒展状态的，即使它们确实朝一个方向倒，那么反向冲洗让它们恢复一下初始状态岂不是更好？所以我认为反向冲洗不会对柱床造成影响。

那哪些柱子不能反向冲洗呢？我认为有两种是不能反向冲洗的，一种是两端筛板不一样不宜进行反冲操作，因为入口端筛板孔径大一些会比较能耐固体颗粒物质的堵塞，至少被堵的时间会相对较长，这种情况下一旦反冲就有可能造成填料的流失，导致柱效下降。另一种是有柱头塌陷的色谱柱不宜反冲，因为柱头塌陷了在柱头上留下空间，反冲会导致柱床移动，填料松动、重新分布，但这种柱子您认为还能使用吗？柱头塌陷意味着柱头前面造成比较大的死体积，峰形只怕是早就变样了，您还能指望用这样的柱子进行分析？所以对这种柱子而言反不反冲已经没有任何意义了，因为它已经是根废柱子。